تطبيق منهجية DARTS الجديدة لإيجاد أهداف البروتين لمستخلصات الخلايا الداخلية في عدد محدد من خطوط الخلايا السرطانية

Abstract: Background: DARTS “Drug Affinity Responsive Target Stability” is a novel methodology for identifying and studying protein-ligand interactions. This technique depends on the reduction in the protease susceptibility of the target protein upon drug binding.

Objectives: The aim of this study to prove the effectiveness of the method to identify the molecular target proteins of some bioactive endophyte extracts. The basic idea of this research is studying the possibility of the use of Darts technique for the detection of cellular targets for natural extracts before doing chemically analyzed to determine the type of vehicle which they are located. 

Methodology: To achieve the aim of study, some natural extracts of fungi endophyte were selected for the study, three of which are able to stop the growth of three kinds of cancer cells leukemia and lung cancer and cervical cancer, as demonstrated by tests performed in this study. 

Results: Then Darts technique was used to identify the cellular targets of these extracts successfully. Possible, as already identified a number of proteins that interact with these extracts within the cell. It was possible for first time by using DARTS followed by MALDI-TOF analysis and peptidmass fingerprinting to identify a number of cellular target molecules for bioactive extracts of endophytes. 

Conclusion: This will help reduce the number of extracts that go into the process of drug development because the extracts which is not suitable to be excluded from the start without the need to chemically analyzed to determine composition, which helps to reduce the cost and the time period required by the process of drug development in the future.  This opens up a new area for the use of this technique in the process of scanning cytometry initial natural extracts without having to analyze it chemically which reduces the effort and expense. Finally, A number of very interesting proteins could be identified that might stimulate the researchers in a future study to the chemical composition of these extracts to exactly identify the active component in each of them.

Keywords: DARTS, protein targets, endophyte extracts, cancer, cancer cell lines.

الملخص: هدفت الدراسة الحالية إلى دراسة جدوى طريقة DARTS لتحديد ودراسة التفاعلات بين ربيطات البروتين، وإثبات فعالية الطريقة لتحديد البروتينات المستهدفة الجزيئية لبعض مقتطفات الخلايا الحيوية النشطة بيولوجيا. الفكرة الأساسية لهذا البحث هي دراسة إمكانية استخدام تقنية DARTS للكشف عن الأهداف الخلوية للمستخلصات الطبيعية قبل القيام بالتحليل الكيميائي لتحديد نوع الحاضنة التي توجد فيها. ولتحقيق الهدف من الدراسة، تم اختيار بعض العينات الطبيعية من الفطريات للدراسة، ثلاثة منها قادرة على وقف نمو ثلاثة أنواع من خلايا سرطان الدم وسرطان الرئة وسرطان عنق الرحم، كما يتضح من الاختبارات التي أجريت في هذه الدراسة.

وبينت لنتائج أن استخدام تقنية DARTS لتحديد الأهداف الخلوية لهذه المقتطفات تم بنجاح. كما تم التعرف بالفعل على عدد من البروتينات التي تتفاعل مع هذه العينات داخل الخلية. كان من الممكن لأول مرة باستخدام DARTS متبوعًا بتحليل MALDI-TOF وبصمات الأصابع peptidmass  لتحديد عدد من الجزيئات المستهدفة الخلوية للمستخلصات الحيوية النشطة من العينات الفطرية.

الخلاصة: تساعد هذه الدراسة في تقليل عدد المستخلصات التي تدخل في عملية تطوير الدواء لأن المستخلصات غير المناسبة يتم استبعادها من البداية دون الحاجة إلى تحليل كيميائي لتحديد التركيب، مما يساعد على تقليل التكلفة والوقت الفترة التي تتطلبها عملية تطوير الدواء في المستقبل. هذا يفتح مجالًا جديدًا لاستخدام هذه التقنية في عملية مسح المستخلصات الطبيعية الأولية الخلوية دون الحاجة إلى تحليلها كيميائيًا مما يقلل من الجهد والتكاليف. أخيرًا، يمكن تحديد عدد من البروتينات المثيرة للاهتمام التي قد تحفز الباحثين في دراسة مستقبلية على التركيب الكيميائي لهذه العينات لتحديد المكون النشط في كل منها تمامًا.

الكلمات المفتاحية: DARTS، البروتين، السرطان، الخلايا السرطانية.