تحليل المورفين، المورفين -3 غلوكورونيد، المورفين -6-غلوكورونيد، الكودايين والكودايين -6-الغلوكورونيد باستخدام جهاز الفصل السائل عالي الكفاءة

Abstract: In interpretive forensic and clinical toxicology, there is a great need for the identification and detection of opiate drugs and their various glucuronide metabolites. Glucuronides are usually determined by cleavage of the glucuronide bond with an enzyme (e.g., β-glucuronidase) or acid hydrolysis to yield the parent compound, which is subsequently detected. For Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) analysis this may be via derivatization to a more volatile or stable form. Direct detection of the glucuronide conjugates overcomes the critical limitations of these approaches. 

In this conduct, a rapid and selective reversed-phase high-performance liquid chromatographic (HPLC) assay with gradient elution and ultraviolet detection for morphine, morphine-3-glucuronide, morphine-6-glucuronide, codeine, codeine-6-glucuronide and hydrocodone was developed. The separation was performed on a gemini C18 (Octadecyl carbon chain) analytical column (150  2.0 mm, 5 µm) and detected by an ultraviolet (UV) detector at 210 nm. The mobile phase consisted of an acetonitrile–phosphate buffer (0.0125 M, pH 7.5) with elution in the gradient mode ranging from 7.5–60% acetonitrile over 25 minutes (min) with a 0.2 mL/min flow rate. The calibration curves were linear (R2 range 0.997–0.999) in the concentration range 0.025–2 µg/mL for all analytes, using hydrocodone as the internal standard. 

 Therefore, this conduct aims to develop an efficient method of separation of morphine, codeine and glucuronides by HPLC-UV and to evaluate the use of SPME LC tips for the extraction of morphine, codeine and glucuronides from urine samples.

Keywords: morphine, codeine, glucuronide, toxicology, forensic, HPLC, GC-MS.

الملخص: في علم السموم الشرعي والتفسير السريري، هناك حاجة كبيرة لتحديد واكتشاف العقاقير الأفيونية ومستقلبات الجلوكورونيد المختلفة. عادة ما يتم تحديد الجلوكورونيدات عن طريق انشقاق رابطة الجلوكورونيد مع إنزيم (على سبيل المثال، جلوكورونيداز) أو التحلل المائي الحمضي لإنتاج المركب الأصلي، الذي يتم اكتشافه لاحقًا. بالنسبة لتحليل الطيف الكتلي للغاز GC-MS، قد يكون هذا عن طريق الاشتقاق إلى شكل أكثر تقلبًا أو ثباتًا. الكشف المباشر عن اتحادات الجلوكورونيد يتغلب على القيود الحرجة لهذه الطرق.

في هذا البحث، اختبار كروماتوجرافي السائل عالي الأداء وعكسي الطور عكسي انتقائي مع شطف التدرج والكشف عن الأشعة فوق البنفسجية للمورفين، المورفين 3-الجلوكورونيد، المورفين 6-الجلوكورونيد، الكوكايين، الكودايين -6-الجلوكورونيد والهيدروكودون تم تطويره. تم إجراء الفصل على عمود تحليلي C18 (سلسلة الكربون من Octadecyl) (150 ⋅ 2.0 مم، 5 ميكرون) واكتشفه كاشف الأشعة فوق البنفسجية (UV) عند 210 نانومتر. يتكون الطور المتحرك من مخزن مؤقت من الأسيتون تريل – الفوسفات (0.0125 ، درجة الحموضة 7.5) مع شطف في وضع التدرج تتراوح من 7.5 إلى 60% من الأسيتون تريل على مدى 25 دقيقة (دقيقة) مع معدل تدفق 0.2 مل / دقيقة. كانت منحنيات المعايرة خطية (نطاق R2 من 0.997 إلى 0.999) في نطاق التركيز 0.025-2 ميكروغرام / مل لكل التحليلات، باستخدام الهيدروكودون كمعيار داخلي. لذلك يهدف هذا السلوك إلى تطوير طريقة فعالة لفصل المورفين والكوديين والغلوكورونيدات بواسطة HPLC-UV وتقييم استخدام نصائح SPME LCلاستخراج المورفين والكوديين والجلوكورونيدات من عينات البول.

الكلمات المفتاحية: مورفين، كوديين،جلوكورونايد، السموم، الطب الشرعي.